原位雜交（fish）是指將特定標(biāo)記的已知序列核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交，從而對特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位的過程。
原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行，也可以檢測兩個靶基因的共定位情況。
病理檢測
182 5914 9342
fz_zolgene@163.com
原位雜交（FISH）
? 產(chǎn)品介紹
? 載基優(yōu)勢
1.采用進(jìn)口abcam、CST、Santa、omnimabs抗體；
2.可免費使用我司細(xì)胞庫、組織庫已有細(xì)胞或石蠟切片，無需購買；
3.提供完整的實驗數(shù)據(jù)及實驗報告(包括實驗儀器、試劑、方法步驟、結(jié)果、數(shù)據(jù)分析、結(jié)論等)。
? 實驗流程
? 實驗步驟
1.石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，用免疫組化筆畫圈。
2.消化：根據(jù)組織固定時間長短，切片置于修復(fù)液中煮沸10-15min，自然冷卻。后組化筆畫圈，根據(jù)不同組織不同指標(biāo)特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml)37℃消化20-30min。純水沖洗后PBS洗3次×5min。根據(jù)切片情況選擇最佳消化時間。
3.預(yù)雜交：滴加預(yù)雜交液，37°C孵育1h。
4.雜交：傾去預(yù)雜交液，滴加含探針雜交液,恒溫箱37℃雜交過夜。
5.雜交后洗滌：洗去雜交液，2×SSC，37°C洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室溫洗10min。若非特異雜交體教多，可以增加甲酰胺洗滌。
6.DAPI復(fù)染核：切片滴加DAPI染液，避光孵育8min，沖洗后滴加抗熒光淬滅封片劑封片后于熒光顯微鏡下觀察。
? 結(jié)果示例
小鼠腫瘤組織石蠟切片：
小鼠腫瘤組織石蠟切片：
2.可免費使用我司細(xì)胞庫、組織庫已有細(xì)胞或石蠟切片，無需購買；
3.提供完整的實驗數(shù)據(jù)及實驗報告(包括實驗儀器、試劑、方法步驟、結(jié)果、數(shù)據(jù)分析、結(jié)論等)。
DAB實驗：制備石蠟切片-阻斷-雜交-封閉-滴加anti-DIG-HRP試劑-DAB顯色-復(fù)染細(xì)胞核-封片鏡檢
客戶提供：提供固定后的樣本/包埋后的蠟塊/切片和原位雜交試劑盒，固定液樣本、蠟塊常溫運輸；石蠟切片冰袋運輸；細(xì)胞爬片加原位雜交固定液固定15min后，換無酶PBS，密封，冰袋運輸；原位雜交試劑盒冰袋運輸。
? 實驗步驟
1.石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，用免疫組化筆畫圈。
2.消化：根據(jù)組織固定時間長短，切片置于修復(fù)液中煮沸10-15min，自然冷卻。后組化筆畫圈，根據(jù)不同組織不同指標(biāo)特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml)37℃消化20-30min。純水沖洗后PBS洗3次×5min。根據(jù)切片情況選擇最佳消化時間。
3.預(yù)雜交：滴加預(yù)雜交液，37°C孵育1h。
4.雜交：傾去預(yù)雜交液，滴加含探針雜交液,恒溫箱37℃雜交過夜。
5.雜交后洗滌：洗去雜交液，2×SSC，37°C洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室溫洗10min。若非特異雜交體教多，可以增加甲酰胺洗滌。
6.DAPI復(fù)染核：切片滴加DAPI染液，避光孵育8min，沖洗后滴加抗熒光淬滅封片劑封片后于熒光顯微鏡下觀察。
? 結(jié)果示例
L929細(xì)胞:
小鼠腫瘤組織石蠟切片：
小鼠腫瘤組織石蠟切片：
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